Kết Quả Định Danh Các Dòng Vi Khuẩn Phân Lập Được Bằng Phương Pháp Sinh Hóa

+ Quan sát khuẩn lạc của các các dòng vi khuẩn phân lập trên môi trường TYEG agar có bổ sung 0,002 % bromocresol purple cho thấy: hầu hết các dòng vi khuẩn phân lập sinh trưởng rất chậm, khuẩn lạc xuất hiện rõ sau 72 giờ nuôi cấy, kích thước khuẩn lạc nhỏ (Hình 4.2).

+ Hình dạng khuẩn lạc: tất cả khuẩn lạc đều có dạng tròn, mô cao hoàn toàn trên bề mặt môi trường, bìa nguyên.

+ Màu sắc khuẩn lạc: khuẩn lạc của các dòng vi khuẩn phân lập trên môi trường TYEG agar có bổ sung bromocresol purple, đều có màu vàng từ nhạt đến đậm. Trong tổng số 45 dòng vi khuẩn phân lập, phần lớn khuẩn lạc có màu vàng nhạt: 34 dòng có màu vàng nhạt chiếm 75,6 % và 11 dòng có màu vàng đậm chiếm 24,4 % (Bảng 4.8).

+ Kích thước khuẩn lạc: đường kính khuẩn lạc của các dòng vi khuẩn phân lâp có kích thước dao động 0,8–1,5 mm sau 72 giờ nuôi cấy, kỵ khí ở 37 oC.

Hình 4.2 Khuẩn lạc của dòng vi khuẩn phân lập trên môi trường TYEG agar có bổ sung 0.002 % bromocresol purple

a. Dòng 09N màu vàng nhạt b. Dòng 51N màu vàng đậm

c. Dòng 51N chụp đứng 90o d. Dòng 51N chụp nghiêng 45o

- Đặc điểm của tế bào vi khuẩn

Stt	Dòng Kích thước bào
		Hình dạng	Màu sắc	(mm)
1	01	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,3	Que ngắn
2	9N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,8	Que dài
3	31N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,2	Que ngắn
4	48N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,0	Que ngắn
5	51N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,2	Que ngắn
6	53N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	0,9	Que dài
7	54N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,9	Que dài
8	67N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
9	70N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,8	Que dài
10	72N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
11	73N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,0	Que dài
12	75N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,3	Que ngắn
13	85N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
14	87N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,2	Que ngắn
15	96N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,5	Que ngắn
16	100N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,8	Que dài
17	101N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,0	Que ngắn
18	102N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,2	Que ngắn
19	103N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,2	Que ngắn
20	107N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
21	110N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,3	Que ngắn

Có thể bạn quan tâm!

Xem toàn bộ 108 trang tài liệu này.

Bảng 4.8 Đặc tính khuẩn lạc và hình thái tế bào của các dòng vi khuẩn phân lập

Đặc điểm khuẩn lạc

Hình dạng tế

111N

Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,2	Que ngắn
23	117N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,5	Que ngắn
24	118N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,1	Que ngắn
25	119N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
26	124N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,0	Que dài
27	126N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,5	Que ngắn
28	127N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,1	Que ngắn
29	128N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,3	Que ngắn
30	129N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
31	130N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	0,9	Que dài
32	131N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,8	Que dài
33	132N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,5	Que ngắn
34	133N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,0	Que dài
35	134N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,3	Que ngắn
36	135N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,8	Que dài
37	137N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,8	Que dài
38	138N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
39	146N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	0,9	Que dài
40	148N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	0,8	Que dài
41	151N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,4	Que ngắn
42	154N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,5	Que ngắn
43	159N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,0	Que dài
44	163N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng nhạt	1,4	Que ngắn
45	165N	Tròn, bìa nguyên, nhô cao	Vàng đậm	1,1	Que dài

Hình 4.3 Hình thái của các tế bào vi khuẩn dưới kính hiển vi quang học

a. 51N hình que ngắn b. 9N hình que dài c. 100N hình que dài

Nhận xét: quan sát hình thái của các tế bào vi khuẩn dưới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 1000 lần cho thấy các dòng vi khuẩn đều có dạng hình que (Hình 4.3). Tất cả 45 dòng vi khuẩn phân lập thuộc vi khuẩn Gram dương, bắt màu tím xanh của dung dịch crystal violet.

Trong tổng số 45 dòng vi khuẩn phân lập, phần lớn tế bào của các dòng vi khuẩn phân lập có hình dạng que ngắn với 29 dòng vi khuẩn có hình dạng que ngắn chiếm 64,4 % và 16 dòng có hình dạng que dài chiếm 35,6 % (Bảng 4.8).

4.1.2.2. Kết quả định danh các dòng vi khuẩn phân lập được bằng phương pháp sinh hóa

Tất cả 45 dòng vi khuẩn phân lập thuộc vi khuẩn Gram dương (bắt màu tím xanh của dung dịch crystal violet), thử catalase cho kết quả dương tính (khuẩn lạc làm sủi bọt H2O2 3 %) (Hình 4.4).

Hình 4.4 Thử nghiệm catalase trên dòng vi khuẩn phân lập

a. Đối chứng catalase âm tính b. Dòng 134N catalase dương tính

Tất cả các dòng vi khuẩn phân lập được nuôi cấy trong ống nghiệm chứa môi trường tryptone soya broth 1 % trong 24 giờ ở 37 oC, sau đó được kiểm tra khả năng tạo indol bằng thuốc thử Kovac’s. Kết quả thí nghiệm cho thấy, 45 dòng vi khuẩn phân lập tạo được indol từ môi trường nuôi cấy chứa trytophan vì làm xuất hiện vòng màu đỏ trên bề mặt môi trường. Trong khi dòng đối chứng Staphylococcus aureus không có khả năng này (Hình 4.5).

Vòng Pellicle màu vàng

Vòng Pellicle màu đỏ

Hình 4.5 Kiểm tra khả năng sinh indol trên dòng vi khuẩn phân lập

a. Dòng đối chứng không tạo indol b. Dòng 73N tạo indol

Tất cả các dòng vi khuẩn phân lập sẽ được kiểm tra khả năng làm dịch hóa gelatin bằng cách chích sâu vi khuẩn vào môi trường gelatin. Kết quả thí nghiệm cho thấy, 45 dòng vi khuẩn phân lập làm gelatin trong ống nghiệm hóa lỏng so với ống đối chứng vẫn ở trạng thái ổn định (Hình 4.6).

Hình 4.6 Kiểm tra khả năng làm dịch hóa gelatin trên dòng vi khuẩn phân lập

a. Dòng 54N dịch hóa gelatin dương tính

b. Đối chứng dịch hóa gelatin âm tính

Tất cả các dòng vi khuẩn phân lập sau khi hoạt hóa được kiểm tra khả năng phản ứng nitrat hóa bằng cách cách cấy vi khuẩn vào môi trường chứa dịch chiết tim, pepton và KNO3 đã chuẩn bị sẵn; đặt ở nhiệt độ 37 oC trong 1–7 ngày. Kết quả thí nghiệm cho thấy, 45 dòng vi khuẩn phân lập làm tăng độ đục của dịch nuôi cấy, sinh khí NH3 so với ống đối chứng không có hiện tượng này (Hình 4.7).

Hình 4.7 Kiểm tra khả năng phản ứng nitrat hóa trên dòng vi khuẩn phân lập

a. Ống đối chứng âm tính b. Dòng 51N dương tính vi khuẩn phát triển

Bảng 4.9 Tổng hợp đặc điểm hình thái và sinh hóa của các dòng vi khuẩn phân lập

Stt

Dòng	Hình dạng tế bào	Gram	Catalase	Sinh indol	Gelatin	Nitrat hóa
1	01	Que ngắn	+	+	+	+	+
2	9N	Que dài	+	+	+	+	+
3	31N	Que ngắn	+	+	+	+	+
4	48N	Que ngắn	+	+	+	+	+
5	51N	Que ngắn	+	+	+	+	+
6	53N	Que dài	+	+	+	+	+
7	54N	Que dài	+	+	+	+	+
8	67N	Que ngắn	+	+	+	+	+
9	70N	Que dài	+	+	+	+	+
10	72N	Que ngắn	+	+	+	+	+
11	73N	Que dài	+	+	+	+	+
12	75N	Que ngắn	+	+	+	+	+
13	85N	Que ngắn	+	+	+	+	+
14	87N	Que ngắn	+	+	+	+	+
15	96N	Que ngắn	+	+	+	+	+
16	100N	Que dài	+	+	+	+	+
17	101N	Que ngắn	+	+	+	+	+
18	102N	Que ngắn	+	+	+	+	+
19	103N	Que ngắn	+	+	+	+	+
20	107N	Que ngắn	+	+	+	+	+
21	110N	Que ngắn	+	+	+	+	+
22	111N	Que ngắn	+	+	+	+	+
23	117N	Que ngắn	+	+	+	+	+

118N

Que ngắn	+	+	+	+	+
25	119N	Que ngắn	+	+	+	+	+
26	124N	Que dài	+	+	+	+	+
27	126N	Que ngắn	+	+	+	+	+
28	127N	Que ngắn	+	+	+	+	+
29	128N	Que ngắn	+	+	+	+	+
30	129N	Que ngắn	+	+	+	+	+
31	130N	Que dài	+	+	+	+	+
32	131N	Que dài	+	+	+	+	+
33	132N	Que ngắn	+	+	+	+	+
34	133N	Que dài	+	+	+	+	+
35	134N	Que ngắn	+	+	+	+	+
36	135N	Que dài	+	+	+	+	+
37	137N	Que dài	+	+	+	+	+
38	138N	Que ngắn	+	+	+	+	+
39	146N	Que dài	+	+	+	+	+
40	148N	Que dài	+	+	+	+	+
41	151N	Que ngắn	+	+	+	+	+
42	154N	Que ngắn	+	+	+	+	+
43	159N	Que dài	+	+	+	+	+
44	163N	Que ngắn	+	+	+	+	+
45	165N	Que dài	+	+	+	+	+

Ghi chú (+) dương tính (-) âm tính

Nhận xét: tất cả 45 dòng vi khuẩn phân lập từ 100 mẫu bệnh phẩm của bệnh nhân mụn trứng cá lấy từ bệnh viện Da liễu Cần Thơ và phòng khám Tiến sĩ–Bác sĩ Huỳnh Văn Bá là vi khuẩn P. acnes. Tất cả 45 dòng vi khuẩn phâm lập là vi khuẩn Gram dương và tế bào dạng hình que, không bào tử. Cho kết quả dương tính với: thử