Ảnh Hưởng Của Hexahydropyrrolo [1,2-A] Pyrazine-1,4-Dione Đến Tỷ Lệ Tử Vong Của

Kết quả khảo sát nồng độ của hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione đến tỷ lệ tử vong tuyến trùng và tỷ lệ nở của trứng tuyến trùng ở bảng 3.35 cho thấy, hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione với nồng độ 2,5-20,0 mg/mL làm tử vong 41,18% - 64,2% tuyến trùng tuổi 2 sau 24 giờ xử lý và tỷ lệ nở của trứng chỉ còn 29,09% - 57,68% so với 92,36% (ĐC nước). Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu nào chứng minh hợp chất hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione có khả năng kháng tuyến trùng.

Bảng 3.35. Ảnh hưởng của hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione đến tỷ lệ tử vong của tuyến trùng và tỷ lệ nở của trứng tuyến trùng

Tỷ lệ tử vong tuyến trùng

	Tỷ lệ nở của trứng tuyến trùng (%)
Nồng độ	Tỷ lệ nở của trứng tuyến trùng (%)	3 giờ	6 giờ	9 giờ	12 giờ	24 giờ
2,5mg/mL	4,36±0,29d	9,75±0,36d	17,62±1,17d	24,18±0,48d	41,18±0,61d	57,68±0,37c
5,0mg/mL	9,79±0,54c	22,15±0,76c	27,72±0,80c	35,53±0,64c	48,66±0,19c	47,00±0,49d
10mg/mL	17,24±0,45b	31,35±1,20b	37,66±0,34b	41,61±0,58b	57,11±1,06b	37,84±0,93e
20mg/mL	22,96±0,54a	38,82±1,16a	41,82±0,81a	46,24±0,65a	64,20±0,33a	29,09±0,74f
ĐC DMSO	0,00±0,00e	0,00±0,00e	0,00±0,00e	1,02±0,24e	3,07±0,25e	89,33±0,22b
ĐC nước	0,00±0,00e	0,00±0,00e	0,00±0,00e	0,00±0,00e	0,00±0,00f	92,36±0,29a
P	**	**	**	**	**	**
CV%	4,53	4,76	3,43	2,14	1,49	0,89

Có thể bạn quan tâm!

Xem toàn bộ 224 trang tài liệu này.

Ghi chú: ** Khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,01, các chữ cái giống nhau trên cùng một cột thể hiện sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê theo trắc nghiệm phân hạng Duncan’s Multiple Rang Test.

3.2.3.3. Đánh giá hoạt tính kháng Phytophthora và Fusarium của các hợp chất đã phân tách

Bên cạnh việc đánh giá hoạt tính kháng tuyến trùng của các hợp bao gồm dẫn xuất của Uracil, dẫn xuất của Thymine và hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4- dione, nghiên cứu tiếp tục đánh giá hoạt tính kháng nấm Phyophthora và Fusarium của những hợp chất này. Kết quả bảng 3.36 ghi nhận, hiệu suất đối kháng Phytophthora có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nghiệm thức ở mức p<0,01. Ở nồng độ 20 mg/ml dẫn xuất của Uracil, dẫn xuất của Thymine và hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione có hiệu suất đối kháng Phytophthora cao nhất với hiệu suất đối kháng đạt lần lượt 45,56 %, 41,11 % và 32,22 %. Hiệu suất đối kháng Phytophthora thấp nhất của cả ba hợp chất khi sử dụng với nồng độ 2,5 mg/ml. Syed- Ab-Rahman và cộng sự (2018) xác định được hợp chất kháng Phytophthora sp. là hexahydropyrrolo[1,2-a] pyrazine-1,4-dione từ cao chiết dichloromethane của dịch nuôi cấy chủng B. myloliquefaciens (UQ154) [193].

Bảng 3.36. Hiệu suất đối kháng (%) Phytophthora của dẫn xuất của Uracil, dẫn xuất của Thymine và hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione

Nồng độ

Dẫn xuất của Uracil	Dẫn xuất của Thymine	Hexahydropyrrolo[1,2-a] pyrazine-1,4-dione
2,5mg/mL	3,33±0,00d	2,78±0,96d	1,67±0,00d
5,0mg/mL	21,11±0,96c	18,33±0,00c	7,78±1,92c
10mg/mL	31,11±0,96b	29,44±0,96b	24,44±1,92b
20mg/mL	45,56±0,96a	41,11±0,96a	32,22±0,96a
ĐC DMSO	0,00±0,00e	0,00±0,00e	0,00±0,00d
ĐC	0,00±0,00e	0,00±0,00e	0,00±0,00d
P	**	**	**
CV%	4,31	4,45	10,93

Ghi chú: HSĐK: Hiệu suất đối kháng; ** Khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,01, các chữ cái giống nhau trên cùng một cột thể hiện sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê theo trắc nghiệm phân hạng Duncan’s Multiple Rang Test.

Kết quả bảng 3.37 cho thấy, hoạt tính kháng nấm Fusarium sp. ở cả ba hợp chất (dẫn xuất của Uracil, dẫn xuất của Thymine và hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione) đạt cao nhất ở nồng độ 20 mg/ml với hiệu suất đối kháng lần lượt đạt 43,33 %, 43,89 % và 29,44%. Hoạt tính kháng Phytophthora thấp nhất của cả ba hợp chất khi sử dụng với nồng độ 2,5 mg/ml. Kumar và cộng sự (2004) thu nhận được

13 mg hợp chất Cyclo (D-Pro-L-Met), (3R,8aS)-3-2 (methylsulfanyl) ethyl hexahydropyrrolo[1,2-a] pyrazine-1,4-dione trên sắc cột sắc ký HPLC từ cao chiết ethyl acetate của dịch huyền phù vi khuẩnBacillus cereus subsp. Thuringiensis [194]. Hợp chất này có khả năng kháng nấm F. oxysporum với nồng độ 4 µg/ml.

Bảng 3.37. Hiệu suất đối kháng (%) nấm Fusarium sp. của dẫn xuất của Uracil, dẫn xuất của Thymine và hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4-dione

Nồng độ

Dẫn xuất của Uracil	Dẫn xuất của Thymine	Hexahydropyrrolo[1,2- a] pyrazine-1,4-dione
2,5mg/mL	3,33±0,00d	1,11±0,96d	1,11±0,96d
5,0mg/mL	20,00±0,00c	16,67±0,00c	6,67±0,00c
10mg/mL	31,11±0,96b	27,22±0,96b	19,44±0,96b
20mg/mL	43,33±1,67a	43,89±0,96a	29,44±0,96a
ĐC nước	0,00±0,00e	0,00±0,00d	0,00±0,00d
ĐC DMSO	0,00±0,00e	0,00±0,00d	0,00±0,00d
P	**	**	**
CV%	4,82	4,89	7,21

Kết luận nội dung 2:

Xác định được cơ chế kháng nấm dựa trên hoạt tính enyme thủy phân và một số hợp chất thứ cấp kháng nấm P. capsici và F. oxysporum của hai chủng Bacillus velezensis RB.DS29 và Bacillus subtilis RB.CJ41.

Xác định được cơ chế kháng tuyến trùng dựa trên hoạt tính enzyme thủy phân và hợp chất thứ cấp kháng tuyến trùng là Hexahydropyrrolo [1,2-a] pyrazine-1,4- dione từ chủng Bacillus velezensis RB.EK7.

3.3. Bước đầu tạo chế phẩm vi sinh phòng trừ nấm và tuyến trùng từ các chủng vi khuẩn tuyển chọn

3.3.1. Sản xuất chế phẩm vi khuẩn vùng rễ có khả năng kháng Phytophthora

3.3.1.1. Ảnh hưởng của các chất mang khác nhau đến mật độ vi khuẩn Bacillus velezensis RB.DS29 theo thời gian bảo quản chế phẩm

Nghiệm thức	0 ngày (x109CFU/g)		Mật độ vi khuẩn (x107CFU/g chế phẩm)
Nghiệm thức	0 ngày (x109CFU/g)	30 ngày	60 ngày	90 ngày	120 ngày	150 ngày	180 ngày
Bột mì	209,33c	473,3c	154,67b	12,53d	2,49b	0,97b	0,12cd
Cám gạo	343,33bc	1056,67a	202,33a	24,60a	0,43c	0,33bc	0,14c
Cao lanh	426,67ab	700,00bc	34,33d	7,90e	1,00c	0,38bc	0,09d
Talc	234,67c	726,67bc	91,00 c	18,43b	2,27b	0,43bc	0,18b
Lactose	333,33bc	856,67ab	99,67c	7,57e	2,73b	0,24c	0,05e
Hỗn hợp	530,00a	696,67bc	107,67c	15,93c	15,87a	10,53a	0,59a
CV%	15,71	23,86	15,53	2,92	8,90	17,93	10,55
P	**	**	**	**	**	**	**

Tiến hành nghiên cứu nhân nuôi vi khuẩn Bacillus velezensis RB.DS29 trong Bioreactor 15 L, BiFlo, Brunwick, Hoa Kỳ của Viện CNSH & MT, Trường Đại học Tây Nguyên. Sau 8 giờ nhân nuôi trong bioreactor mật độ vi khuẩn B. velezensis RB.DS29 đạt 8,18 x 1010 CFU/ml được phối trộn với các chất mang đã chuẩn bị. Tỷ lệ phối trộn: 150 ml dung dịch vi khuẩn/kg nguyên liệu. Thời điểm ngay sau khi đóng gói (0 ngày), mật độ vi khuẩn cao nhất ở nghiệm thức cám gạo (1873,3 x 109 CFU/g chế phẩm), lactose (1866,7 x109 CFU/g chế phẩm) và bột mì (1533,3 x109 CFU/g chế phẩm) và mật độ thấp nhất ở nghiệm thức cao lanh (125,3 x1010 CFU/g chế phẩm). Bảng 3.38. Ảnh hưởng của chất mang đến mật độ chủng RB.DS29

*Ghi chú: ** Khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,01, các chữ cái giống nhau

trên cùng một cột thể hiện sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê theo trắc nghiệm phân hạng Duncan’s Multiple Rang Test.

Kết quả khảo sát mật độ vi khuẩn Bacillus velezensis RB.DS29 trong các loại chế phẩm ở các loại chất mang khác nhau theo thời gian bảo quản chế phẩm được trình bày ở bảng 3.38 cho thấy, có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê ở các nghiệm thức với p<0,01 ở tất cả các thời điểm khảo sát 0 ngày, 30 ngày, 60 ngày, 90 ngày, 120 ngày, 150 ngày và 180 ngày. Mật độ vi khuẩn ở tất cả các nghiệm thức chất mang giảm dần từ 109 CFU/g (ở thời điểm 30 ngày) xuống còn 106 CFU/g (ở thời điểm 180 ngày). Sau 180 ngày mật độ vi khuẩn ở nghiệm thức hỗn hợp (0,59 x 107 CFU/g chế phẩm) cao nhất gấp 11,8 lần nghiệm thức thấp nhất lactose (0,05 x 107 CFU/g chế phẩm). Các nghiệm thức còn lại cao lanh, bột mì, cám gạo, talc, mật độ vi khuẩn đạt lần lượt 0,09 x 107 CFU/g chế phẩm, 0,12 x 107 CFU/g chế phẩm, 0,14 x 107 CFU/g chế phẩm và 0,18 x 107 CFU/g chế phẩm.

Kết quả nghiên cứu của Omer và cộng sự (2010) cũng ghi nhận, các chế phẩm chứa chất mang dạng trơ dùng để bảo quản các chủng vi khuẩn hình thành nội bào tử như Bacillus sp. đều có mật độ giảm dần theo thời gian [195]. Trong đó một số vi khuẩn sẽ giảm mạnh trong tháng đầu do chưa thích nghi được với môi trường mới và chưa đủ thời gian hình thành nội bào tử. Nhìn chung, qua khảo sát thời gian bảo quản của chế phẩm Bacillus velezensis sau 06 tháng cho thấy, cám gạo, hỗn hợp và talc cho mật độ vi khuẩn cao nhất so với các nghiệm thức còn lại bột mì, lactose và cao lanh. Cám gạo và talc chứa một lượng lớn khoáng vi lượng (Cu, Fe, Zn,…) và khoáng đa lượng (Ca, Mg, Si,…) có vai trò tăng cường quá trình hình thành nội bào tử, điều này có thể góp phần duy trì mật độ vi khuẩn được ổn định theo thời gian bảo quản. Nghiên cứu của Mokhtarnejad và cộng sự (2011) cũng cho thấy, cám có khả năng kích thích tăng sinh các tế bào sinh dưỡng cũng như phá vỡ trạng thái ngủ của nội bào tử nên mật độ vi khuẩn cao hơn so với các nghiệm thức còn lại [196]. Kết quả nghiên cứu cho thấy, bột talc là một trong những nghiệm thức duy trì mật độ vi khuẩn ổn định qua các tháng bảo quản và kết quả này tương đồng với các nghiên cứu của Đặng Hoài An, Muis, Nashw [197], [198], [199].

3.3.1.2. Khả năng kháng Phytophthora của chế phẩm vi khuẩn Bacillus velezensis RB.DS29 theo thời gian bảo quản chế phẩm

Các nghiệm thức chất mang đều được khảo sát khả năng đối kháng Phytophthora

trong điều kiện in vitro nhằm chọn ra nghiệm thức chất mang có thể duy trì khả năng đối

kháng của vi khuẩn Bacillus velezensis RB.DS29.

Bảng 3.39. Ảnh hưởng của chất mang đến khả năng kháng nấm của vi khuẩn Bacillus velezensis RB.DS29

Nghiệm

thức

	Hiệu suất đối kháng Phytophthora (%)
30 ngày	60 ngày	90 ngày	120 ngày	150 ngày	180 ngày
Bột mì	57,00cd	54,33bc	56,67bc	53,67	52,00bc	44,67
Cám gạo	62,67ab	61,00a	57,00a	56,00	51,67c	56,00
Cao lanh	57,67bcd	56,00abc	56,33ab	53,33	56,00a	53,00
Talc	62,00abc	60,00ab	56,00ab	54,33	48,00d	54,33
Lactose	56,00d	52,33bc	52,67c	51,33	54,33c	46,00
Hỗn hợp	63,00a	60,33ab	57,00a	56,00	55,33ab	53,67
CV%	3,26	4,12	1,97	3,33	2,67	9,77
P	**	**	**	ns	**	ns

Ghi chú: ns: Khác biệt không có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,05, ** Khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,01, các chữ cái giống nhau trên cùng một cột thể hiện sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê theo trắc nghiệm phân hạng Duncan’s Multiple Rang Test.

Sau 180 ngày bảo quản với các chất mang khác nhau (cám gạo, bột mì, lactose, tale cao lanh và hỗn hợp), hoạt tính kháng nấm của chủng RB.DS29 giảm dần theo thời gian bảo quản từ 62,67 % xuống còn 44,67% (Bảng 3.39) và không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nghiệm thức. Tuy nhiên, nghiệm thức cám gạo vẫn duy trì hiệu suất đối kháng nấm cao nhất đạt 56%. Trong đó, ở nghiệm thức hỗn hợp, cám gạo và talc vi khuẩn vẫn còn khả năng đối kháng cao với nấm bệnh (50% - 70%). Tuy nhiên, ở nghiệm thức lactose, khả năng đối kháng nấm bệnh của chủng vi khuẩn vùng rễ giảm xuống mức trung bình (30% - 50%). Nhìn chung, Bacillus velezensis RB.DS29 trong tất cả các nghiệm thức chất mang vẫn còn khả năng đối kháng với nấm bệnh sau 06 tháng bảo quản.

3.3.2. Sản xuất chế phẩm vi sinh vật ngoại sinh vùng rễ có khả năng kháng nấm Fusarium

3.3.2.1. Ảnh hưởng của các chất mang khác nhau đến mật độ Bacillus subtilis RB.CJ41 theo thời gian bảo quản chế phẩm

Sau 6 giờ nhân nuôi trong bioreactor, mật độ vi khuẩn Bacillus subtilis

RB.CJ41 đạt 5,56 x 1011 CFU/ml được phối trộn với các chất mang bột mì, cao lanh,

cám gạo, lactose, talc đã chuẩn bị. Tỷ lệ phối trộn: 150 ml dung dịch vi khuẩn/kg nguyên liệu.

Bảng 3.40. Ảnh hưởng của chất mang đến mật độ chủng RB.CJ41

Nghiệm

thức

0 ngày (x109CFU/g)		Mật độ vi khuẩn (x107 CFU/g)
0 ngày (x109CFU/g)	30 ngày	60 ngày	90 ngày	120 ngày	150 ngày	180 ngày
Bột mì	209,33c	154,33d	101,67b	75,00c	4,17d	1b	0,078b
Cao lanh	343,33bc	154,33d	146,33a	136,00a	8,77b	1,06b	0,082b
Cám gạo	426,67ab	263,33b	29,67d	26,67e	1,43e	0,46c	0,017d
Lactose	234,67c	206,33c	148,33a	99,67b	11,87a	1,38a	0,12a
Talc	333,33bc	263,33b	74,33c	42,33de	6,03c	0,98b	0,012d
Hỗn hợp	530,00a	436,67a	66,00c	58,00d	3,23d	0,56c	0,04c
P	**	**	**	**	**	**	**
CV%	16,82	6,34	6,04	8,29	10,39	7,09	8,48

*Ghi chú: ** Khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,01, các chữ cái giống nhau trên cùng một cột thể hiện sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê theo trắc nghiệm phân hạng Duncan’s Multiple Rang Test.

Kết quả khảo sát mật độ vi khuẩn Bacillus subtilis RB.CJ41 trong các loại chế phẩm với các chất mang khác nhau theo thời gian bảo quản chế phẩm được trình bày ở bảng 3.40 cho thấy, thời điểm ngay sau khi đóng gói mật độ cao nhất ở nghiệm thức hỗn hợp (530 x 109 CFU/g chế phẩm) và mật độ thấp nhất ở nghiệm thức bột mì (209,33 x 109 CFU/g chế phẩm). Sau đó, mật độ vi khuẩn ở tất cả các nghiệm thức chất mang giảm dần từ khi chủng vi khuẩn đối kháng vào chế phẩm và tiếp tục giảm dần theo thời gian bảo quản. Nghiệm thức lactose vẫn đạt mật độ vi khuẩn cao nhất và khác biệt so với các nghiệm thức còn lại. Mật độ vi khuẩn ở nghiệm thức lactose cao nhất (0,123 x 107 CFU/g chế phẩm) gấp 10,22 lần nghiệm thức talc thấp nhất (0,012 x 107 CFU/g chế phẩm). Nghiệm thức bột mì, cao lanh, hỗn hợp, giảm thấp nhất lần lượt là 12,77 lần, 12,88 lần, 13,98 lần, và nghiệm thức giảm cao nhất lần lượt là cám gạo và talc lần lượt là 27,11 lần và 81,46 lần. Nhìn chung, qua khảo sát thời gian bảo quản của chế phẩm Bacillus subtilis RB.CJ41 sau 06 tháng cho thấy, nghiệm thức lactose, cao lanh, bột mì cho mật độ vi khuẩn cao hơn so với các nghiệm thức còn lại cám gạo, talc, hỗn hợp.

3.3.2.2. Khả năng kháng nấm của chế phẩm vi khuẩn Bacillus subtilis RB.CJ41 dạng bột theo thời gian bảo quản chế phẩm

Kết quả bảng 3.41 cho thấy, ở các thời điểm bảo quản khác nhau từ 30 ngày đến 180 ngày, khả năng kháng nấm Fusarium oxysporum của vi khuẩn Bacillus subtilis RB.CJ41 trong các nghiệm thức bột mì, cao lanh, cám gạo, lactose, talc, hỗn hợp có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,01. Hiệu suất đối kháng nấm đạt cao nhất ở nghiệm thức cao lanh vào tất cả các thời điểm khảo sát từ 58,33% (thời điểm 30 ngày) còn 51,67% (thời điểm 180 ngày).

Bảng 3.41. Ảnh hưởng của chất mang đến hiệu suất đối kháng (%) nấm Fusarium oxysporum của vi khuẩn Bacillus subtilis RB.CJ41

Nghiệm

thứ

30 ngày	60 ngày	90 ngày	120 ngày	150 ngày	180 ngày
Bột mì	56,67ab	54,167ab	50,00b	47,5b	42,50b	42,50c
Cao lanh	58,33a	57,5a	56,67a	55,83a	54,17a	51,67a
Cám gạo	54,167b	50,00b	50,00b	45,83b	45,00b	45,00abc
Lactose	55,83ab	55,83ab	50,83ab	46,67b	45,83ab	44,167bc
Talc	56,67ab	54,17ab	52,50ab	47,50b	42,50b	42,50c
Hỗn hợp	55,00ab	55,00ab	51,67ab	51,67ab	50,83ab	50,83ab
P	**	**	**	**	**	**
CV%	2,53	5,21	4,79	4,99	7,28	5,91

Sau 06 tháng bảo quản, hiệu suất đối kháng nấm bệnh ở các nghiệm thức chế phẩm sử dụng các chất mang khác nhau dao động từ 42,5% – 61,67%. Nghiệm thức cao lanh, hỗn hợp vẫn còn khả năng đối kháng cao với nấm bệnh (50% - 70%), các nghiệm thức bột mì, cám gạo, lactose, talc khả năng đối kháng nấm bệnh của chủng vi khuẩn vùng rễ giảm xuống mức vừa phải (30% - 50%). Nhìn chung, Bacillus subtilis RB.CJ41 trong tất cả các nghiệm thức chất mang vẫn còn khả năng đối kháng với nấm Fusarium oxysporum sau 06 tháng bảo quản.

3.3.3. Nghiên cứu sản xuất chế phẩm vi sinh vật ngoại sinh vùng rễ có khả năng kháng tuyến trùng

3.3.3.1. Ảnh hưởng của các chất mang khác nhau đến mật độ vi khuẩn Bacillus velezensis RB.EK7 theo thời gian bảo quản chế phẩm

Sau 10 giờ nhân nuôi trong bioreactor (thể tích 15L) mật độ vi khuẩn Bacillus velezensis RB.EK7 đạt 4,36 x 1011 CFU/ml được phối trộn với chất mang bột mì, cao lanh, cám gạo, lactose và talc đã chuẩn bị. Tỷ lệ phối trộn: 150 ml dung dịch vi khuẩn/kg nguyên liệu.

Kết quả khảo sát mật độ vi khuẩn Bacillus velezensis RB.EK7 trong các loại chế phẩm ở các loại chất mang khác nhau theo thời gian bảo quản chế phẩm được trình bày ở bảng 3.42.

Nghiệm thức	0 ngày (x109CFU/g)		Mật độ vi khuẩn (x107 CFU/g)
Nghiệm thức	0 ngày (x109CFU/g)	30 ngày	60 ngày	90 ngày	120 ngày	150 ngày	180 ngày
Bột mì	162,00b	1300,00b	910,00c	61,33b	50,33bcd	4,17bc	2,17c
Cao lanh	60,33d	666,70c	290,00d	70,00b	32,00d	3,83bc	1,87c
Cám gạo	264,67a	2433,30a	1270,00b	75,33b	58,00bc	5,10ab	2,63bc
Lactose	140,33bc	670,00c	366,67d	75,00b	37,67cd	6,47a	1,77c
Talc	126,67c	2470,00a	2220,00a	224,67a	144,33a	6,43a	3,6a
Hỗn hợp	59,67d	993,30bc	316,67d	73,33b	66,33b	2,67c	3,5ab
P	*	**	**	**	**	**	**
CV%	10,23	12,85	12,95	13,05	14,44	12,92	14,41

Bảng 3.42. Ảnh hưởng của chất mang đến mật độ chủng RB.EK7

*Ghi chú: * Không có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,05, ** Khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức p<0,01, các chữ cái giống nhau trên cùng một cột thể hiện sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê theo trắc nghiệm phân hạng Duncan’s Multiple Rang Test.

Thời điểm ngay sau khi đóng gói, mật độ chủng RB.EK7 có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các nghiệm thức ở mức p<0,05. Mật độ vi khuẩn cao nhất ở nghiệm thức cám gạo (264,67 x109 CFU/g chế phẩm), và mật độ thấp nhất ở nghiệm thức hỗn hợp (59,67x109 CFU/g chế phẩm). Sau đó, mật độ vi khuẩn ở tất cả các nghiệm thức chất mang giảm dần từ khi chủng vi khuẩn đối kháng vào chế phẩm và tiếp tục giảm dần theo thời gian bảo quản. Thời điểm 6 tháng sau bảo quản, nghiệm thức hỗn hợp, talc có mật độ vi khuẩn cao nhất gấp từ 1,33 lần – 2,03 lần so với các nghiệm thức còn lại. Nhìn chung, qua khảo sát thời gian bảo quản của chế phẩm Bacillus velezensis RB.EK7 sau 06 tháng cho thấy, nghiệm thức talc và hỗn hợp cho mật độ vi khuẩn cao hơn so với các nghiệm thức còn lại cám gạo, cao lanh, bột mì, lactose.

3.3.3.2. Khả năng kháng tuyến trùng của chế phẩm vi sinh vật vùng rễ theo thời gian