Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam - 1


BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC

VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

Có thể bạn quan tâm!

Xem toàn bộ 144 trang tài liệu này.

Nghiên cứu khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ của một số chủng vi khuẩn tía quang hợp tạo màng sinh học phân lập tại Việt Nam - 1


HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

-----------------------------


NGUYỄN THỊ MINH NGUYỆT NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HYDROCARBON DẦU MỎ CỦA 1


NGUYỄN THỊ MINH NGUYỆT


NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HYDROCARBON DẦU MỎ CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN TÍA QUANG HỢP TẠO

MÀNG SINH HỌC PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM


LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC


HÀ NỘI – 2022


VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

……..….***…………


NGUYỄN THỊ MINH NGUYỆT


NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG PHÂN HỦY HYDROCARBON DẦU MỎ CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN TÍA QUANG HỢP TẠO

MÀNG SINH HỌC PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM


LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC

Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 9 42 01 07


Người hướng dẫn khoa học:

1. TS. Lê Thị Nhi Công

2. PGS.TS. Đồng Văn Quyền


Hà Nội – 2022

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành luận án này, trước tiên tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới TS. Lê Thị Nhi Công - Trưởng phòng Công nghệ sinh học môi trường và PGS.TS. Đồng Văn Quyền, Phó Viện trưởng Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã trực tiếp hướng dẫn, truyền đạt những kiến thức và những kinh nghiệm qúy báu trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài nghiên cứu.

Tôi xin chân thành cảm ơn TS. Đỗ Thị Liên và toàn thể các anh, chị cán bộ nhân viên phòng CNSH môi trường Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, chỉ bảo và đóng góp những lời khuyên bổ ích trong suốt quá trình học tập nghiên cứu để tôi có thể hoàn thành luận án.

Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn chân thành đến Ban lãnh đạo Viện Công nghệ sinh học, Ban lãnh đạo Học viện Khoa học và Công nghệ đã tạo mọi điều kiện cho tôi được học tập và nghiên cứu trong suốt những năm qua.

Bên cạnh đó, tôi cũng xin chân thành cảm ơn chuyên viên Bùi Thị Hải Hà phụ trách đào tạo của Viện Công nghệ sinh học và chuyên viên Nguyễn Thị Minh Tâm phòng Đào tạo, Học viện Khoa học và Công nghệ đã giúp đỡ tôi hoàn thành những thủ tục cần thiết trong suốt quá trình nghiên cứu sinh và bảo vệ luận án.

Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Quỹ Nghiên cứu cơ bản cấp Nhà nước (Nafosted) đã cấp kinh phí cho nhóm nghiên cứu.

Trong thời gian qua, tôi đã nhận được sự hỗ trợ nhiệt tình và tạo mọi điều kiện thuận lợi từ trường ĐH Sư phạm Hà Nội 2 nơi tôi đang công tác, cùng với sự giúp đỡ nhiệt tình cũng như những đóng góp quý báu của các bạn bè đồng nghiệp. Nhân dịp này tôi xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ quý báu đó.

Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến những người thân trong gia đình, những người bạn thân thiết đã luôn bên cạnh động viên và khích lệ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu.

Một lần nữa tôi xin chân thành cảm ơn!

Tác giả luận án


Nguyễn Thị Minh Nguyệt


LỜI CAM ĐOAN


Tôi xin cam đoan:


Đây là công trình nghiên cứu của tôi và một số kết quả cùng cộng tác với các cộng sự khác;

Các số liệu và kết quả trình bày trong luận án là trung thực, một phần đã được công bố trên các tạp chí khoa học chuyên ngành với sự đồng ý và cho phép của các đồng tác giả;

Phần còn lại chưa được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác.

Tôi xin cam đoan mọi sự giúp đỡ đã được cảm ơn, các tài liệu trích dẫn đã được chỉ rõ nguồn gốc.

Hà Nội, ngày tháng năm 2022

Tác giả luận án


Nguyễn Thị Minh Nguyệt


MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1

CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

1.1. Một số đặc điểm sinh học cơ bản của vi khuẩn tía quang hợp . 3

1.1.1. Giới thiệu chung về vi khuẩn tía quang hợp 3

1.2.2. Sinh thái học của vi khuẩn tía quang hợp 3

1.2.3. Đa dạng vi khuẩn tía quang hợp 4

1.2.4. Đặc điểm của bộ máy quang hợp 9

1.2.5. Dinh dưỡng carbon 12

1.2. Ứng dụng của vi khuẩn tía quang hợp để phân hủy hydrocarbon dầu mỏ13

1.2.1. Tính độc của hydrocarbon dầu mỏ 13

1.2.2. Các phương pháp xử lý ô nhiễm dầu mỏ 18

1.2.3. Ứng dụng của vi khuẩn tía quang hợp để phân hủy hydrocarbon

dầu mỏ22

1.3. Vi sinh vật có khả năng phân hủy hydrocarbon dầu mỏ và tạo màng sinh học 24

CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30

2.1. Vật liệu nghiên cứu 30

2.1.1. Nguyên liệu 30

2.1.2. Hóa chất, môi trường nuôi cấy 31

2.1.3. Các thiết bị máy móc 32

2.2. Phương pháp nghiên cứu 33

2.2.1. Các phương pháp phân tích vi sinh vật 34

2.2.2. Các phương pháp sinh học phân tử 42

2.2.3. Nhóm phương pháp phân tích hóa học 43

2.2.4. Xử lý thống kê 43

CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44

3.1. Kết quả phân lập và tuyển chọn các chủng VKTQH khả năng

tạo màng sinh học và phân hủy hydrocarbon dầu mỏ 44

3.1.1. Kết quả phân lập các chủng VKTQH từ các mẫu nước và bùn ô

nhiễm dầu44

3.1.2. Tuyển chọn các chủng VKTQH khả năng tạo màng sinh học và

phân hủy hydrocarbon dầu mỏ 48

3.2. Các đặc điểm sinh học và định danh ba chủng DQ41, DD4 và FO256

3.2.1. Các đặc điểm hình thái 56

3.2.2. Trình tự 16S rRNA và định danh ba chủng DQ41, DD4 và FO2 .. 58 3.2.3. Các đặc điểm sinh học 59

3.3. Ảnh hưởng của một số điều kiện môi trường đến sự hình thành màng sinh học của 3 chủng VKTQH 63

3.3.1. Ảnh hưởng của nhiệt độ 63

3.3.2. Ảnh hưởng của pH 64

3.3.3. Ảnh hưởng của nồng độ muối (NaCl) 65

3.4. Hiệu suất phân hủy một số hydrocarbon dầu mỏ của màng sinh học từ 3 chủng VKTQH 66

3.4.1. Hiệu suất phân hủy một số hydrocarbon thơm bởi màng sinh học đơn chủng không gắn giá thể của các chủng VKTQH được lựa

chọn66

3.4.2. Phân hủy hydrocarbon dầu mỏ bởi màng sinh học từ các VKTQH

lựa chọn 69

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 97

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 98

TÀI LIỆU THAM KHẢO 99

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT


Chữ viết tắt

Tiếng Anh

Tiếng Việt

BA

Benzoic acid

Axit benzoic

Bchl

Bacteriochlorophyl


BLAST

Basic local alignment search

tool

Công cụ tìm kiếm các trình tự

tương đồng

BOD

Biochemical oxygen demand

Nhu cầu oxy sinh hóa

BTNMT


Bộ tài nguyên môi trường

CB

Cinder bead

Sỏi nhẹ

CF

Coconut fiber

Xơ dừa

CFU

Colony Forming Unit

Đơn vị hình thành khuẩn lạc

COD

Chemical oxygen demand

Nhu cầu oxy hoá học

DAD

Diode array detector

Detectơ dãy diode

DNA

Deoxyribonucleic acid

Axit đeoxyribônuclêic

DSMZ

Deutch samplung

microorganism zentrum

Trung tâm lưu trữ giống vi sinh

vật – Đức

GCMS

Gas chromatography – Mass

spectrometry

Sắc kí khối phổ

HPLC

High performance – Liquid

chromatography

Sắc kí lỏng cao áp

MSH


Màng sinh học

OD

Optical density

Mật độ quang

PAH

Polycyclic aromatic

hydrocarbon

Hydrocacbon thơm đa vòng

PCR

Polymerase chain reaction

Chuỗi phản ứng trùng hợp

PUF

Polyurethare foam

Mút xốp

QCVN


Quy chuẩn Việt Nam

rARN

Ribosomal ribonucleic acid

Axit ribônuclêic ribôxôm

RNA

Ribonucleic acid

Axit ribônuclêic

TCVN


Tiêu chuẩn Việt Nam

VK


Vi khuẩn

VKTQH


Vi khuẩn tía quang hợp

PNSB

Purple non-sulfur

photosynthetic bacteria

Vi khuẩn tía quang hợp không lưu

huỳnh

PSB

Purple sulfur photosynthetic

bacteria

Vi khuẩn tía quang hợp lưu huỳnh

VSV


Vi sinh vật


DANH MỤC BẢNG


Bảng 1.1.

Các chi vi khuẩn tía quang hợp ..................................................

6

Bảng 1.2.

Những ảnh hưởng đến sức khỏe con người và động vật ............

17

Bảng 1.3.

Các chi vi khuẩn có khả năng phân huỷ hiếu khí hydrocarbon

thơm ............................................................................................

24

Bảng 1.4.

Các chi vi khuẩn có khả năng phân huỷ hiếu khí hydrocarbon

no ................................................................................................

24

Bảng 1.5.

Các nhóm vi khuẩn có khả năng phân huỷ kỵ khí hydrocarbon

25

Bảng 2.1.

Các loại giá thể ...........................................................................

31

Bảng 3.1.

Kết quả phân lập các chủng VKTQH từ mẫu các mẫu nước và bùn ô nhiễm dầu..........................................................................


45

Bảng 3.2.

Khả năng sinh trưởng và phát triển của các chủng VKTQH đã phân lập được (theo ∆OD800) ......................................................


48

Bảng 3.3.

Khả năng sinh trưởng và phát triển trên các nguồn cơ chất của VKTQH ......................................................................................


56

Bảng 3.4.

So sánh mức độ sử dụng một số nguồn C của ba chủng DQ41, DD4 và FO2 với đại diện của loài Rhodopseudomonas.............


62

Bảng 3.5.

Khả năng phân hủy một số hydrocarbon thơm của màng sinh học do 3 chủng VKTQH tạo thành sau 14 ngày nuôi cấy. .........


67

Bảng 3.6.

Sự phân hủy thành phần (%) của 20 (g) dầu thô sau 14 ngày nuôi cấy.......................................................................................


90

Bảng 3.7.

Sự phân hủy hydrocacbon no (%) của dầu thô sau 14 ngày nuôi cấy bởi MSH đơn chủng và đa chủng VKTQH không giá

thể................................................................................................


93

..... Xem trang tiếp theo?
⇦ Trang trước - Trang tiếp theo ⇨

Ngày đăng: 24/02/2023